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小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒常用的ELISA方法

发布时间:2022-05-16   点击次数:124次
       小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒方法的基本原理是酶分子与抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性,此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合,滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应,因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比,此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性的抗原抗体反应的特异性结合起来。
  产品加样:
  加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。
  小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒常用的ELISA方法:
  1.双抗体夹心法测定抗原
  将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面。
  加抗原,形成抗原-抗体复合物。
  加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物。
  加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体)。
  加底物。底物的降解量=抗原量。
  2.竞争法测定抗原
  将抗体吸附在固相载体表面
  (1)加进酶标抗原。
  (2)加进酶标抗原和待测抗原。
  (3)加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差=未知抗原量。
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