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小鼠ELISA试剂盒在进行操作时可能影响结果的原因分析

发布时间:2022-01-11   点击次数:118次
       小鼠ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
  小鼠ELISA试剂盒操作中可能影响结果的原因:
  一、选择试剂
  选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
  二、加样
  可能原因:
  1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
  2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
  3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
  解决办法:
  1)标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
  2)加样后及时放入孵箱。
  3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
  4)如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
  5)标本较多时,请分批操作。
  三、孵育
  可能原因:
  1)孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;
  2)孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
  解决办法:
  1)贴封片或加盖;
  2)按说明步骤严格控制操作时间。
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